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Home製品・サービス情報試薬・材料・消耗品>Connext 社製 カートリッジタイプの組換えコラゲナーゼ

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Connext 社/ TDzyme® 製品
コラゲナーゼ試薬
細菌性コラゲナーゼ / 組換え精製コラゲナーゼ TDzyme®

Connext 社の TDzyme® シリーズは、高純度に精製された組換えコラゲナーゼ(TDzyme®)を製造しています。TDzyme® は、独自技術を用いてパッケージングされており、凍結乾燥された酵素の溶解を容易に行うことが可能です。

カタログダウンロード(PDF)


細菌性コラゲナーゼ


Extracellular matrix (ECM) は、細胞と細胞のすき間を埋めて組織を支える生体高分子の集合体で、主にコラーゲンやエラスチンで構成されています。組織から細胞を分離するためには、このECMを分解する必要があります。主に分解酵素であるコラゲナーゼが用いられますが、組織によってはサーモリシン(thermolysin)などのプロテアーゼ(neutral protease)と組み合わせてECM分解を補うことがあります。
コラゲナーゼは、大きく分けて「動物性コラゲナーゼ」と「細菌性コラゲナーゼ」に分類されます。細菌性コラゲナーゼは、嫌気性細菌であるクロストリジウム属細菌(Clostridium histolyticum)から分泌される酵素です。
Connext社の提供する TDzyme® シリーズは、Clostridium histolyticum 由来のコラゲナーゼ(G/H)を大腸菌発現させた組換え酵素です。カラムクロマトグラフィー技術により、高純度に精製されており、汚染物質・エンドトキシン濃度は極めて低い値を示します。また、サーモリシンのみのパッケージをご用意することにより、組織サンプルの種類に合わせて任意のサーモリシン濃度に調整することができます。


組換え精製コラゲナーゼ TDzyme®

◆特長
1. 独自の技術を用いたカートリッジに凍結乾燥酵素が充填されています。
2. カラムクロマトグラフィーによって高度に精製された精製・混合型酵素(粗製ではない)
3. 低エンドトキシン
4. アニマルフリー・ロット間の一貫性が高い
◆製品紹介

【TDzyme
® C】

コラゲナーゼ G/H+極少量のサーモリシンの混合型。
Clostridium histolyticum 由来組換えコラゲナーゼ(G/H)。膵島をはじめ、様々な組織の分解に適しています。青キャップのカートリッジに凍結乾燥状態で充填されています。

- 基準値 実測値 ※1
CDA活性 8,000 units 以上 16,372 units
エンドトキシンレベル 50 EU/mg 以下 0.87 EU/mg
CDA: 1 unit あたり、37℃(pH7.5)条件下で5時間、コラーゲンから1μMのL-ロイシンを遊離させる。
※1 lot#DTC041101での実測値

【TDzyme
® T】

Geobacillus stearothermophilus 由来サーモリシン。
TDzyme® C と混合することにより、脂肪組織、軟骨、皮膚や血管の細胞外マトリックスなど、より強固な組織の解離を行うことができます。赤キャップのカートリッジに凍結乾燥状態で充填されています。

- 基準値 実測値 ※2
カゼインを基質とした
プロテアーゼ活性
45 units 以上 144.5 units
エンドトキシンレベル
(比濁 LAL 試験)
50 EU/mg 以下 4.8 EU/mg
カゼインを基質としたプロテアーゼ活性:
pH7.5、37℃条件下において、1 unit でカゼインを加水分解し、1分間に1.0μM(181μg)相当のチロシンを発色させる(Folin-Ciocalteu 試薬で発色)。
※2 lot#DTT052301での実測値

(組織タイプごとの使用製品参考)
組織 TDzyme® C TDzyme® C+T
脂肪 -
角膜 -
心臓 -
腎臓 -
肝臓 -
リンパ節
卵巣 -
膵臓 -
脾臓 -

◆価格・ラインアップ

コラゲナーゼG/Hが主な TDzyme® C と、サーモリシンをパッケージングした TDzyme® T をご提供しています。
それぞれの製品を組み合わせ、2 個で 1 pack として販売しております。

-
品名 TDzyme® C Pack TDzyme® T Pack TDzyme® Starter Pack
サイズ/pack TDzyme® C (5mg) x 2個 TDzyme® T (3mg) x 2個 TDzyme® C (5mg) x 1個
TDzyme® T (3mg) x 1個
内容 コラゲナーゼG/H混合物
(低レベルのサーモリシンを含む)
サーモリシン TDzyme® C + TDzyme T
由来 Clostridium histolyticum Geobacillus stearothermophilus -
税別価格 ¥15,000/pack ¥15,000/pack ¥15,000/pack
品番 TDP0010 TDP0006 TDP0008
TDzyme® C: 品番 TDC0005、TDzyme® T: 品番 TDT0003
粗製タイプのコラゲナーゼとは異なり、mgで表される TDzyme® の含有量は、精製された組織解離酵素の含有量のみを示します。TDzyme® では、粗製タイプのコラゲナーゼに含まれるバッファー、安定剤、培地成分などの他の成分は除外されています。粗製タイプのコラゲナーゼでは、組織解離酵素の割合が通常非常に低いのに対し、他の成分の含有割合はかなり高くなります。

◆使用方法

【準備するもの】
・TDzyme® C/T
・精製水(4℃)
・5mL シリンジ 
1個
10mL
1本
・保存用チューブ
・フィルター(必要であれば)

 
1本
1個
 

【使用手順】

1.

TDzyme® 上側のルアーアダプターに、氷冷した 10mL の Milli-Q 水を充填させたシリンジを接続します。

2.

シリンジ内の水を TDzyme カートリッジにゆっくりと注入し、再構成した酵素溶液をチューブに 5mL 採取(5mL の酵素の採取には、1本のチューブを使用すること)。
※TDzyme 下側のルアーに滅菌フィルターを取り付けて、インラインで滅菌ろ過を行うことも可能です。

3.

その後、再構成された酵素溶液が均等になる様によく混ぜる。必要に応じて、酵素を分注する。

使用方法について、動画で分かりやすく解説しています!
日本語解説

英語解説


【保存条件】
溶解前: 2-8℃で保存
溶解後: 2-8℃で取り扱う。長期保存(1ヶ月以内)の場合には凍結する。ただし、凍結融解の繰り返しを避ける。

【関連資料】(2023年1月時点)

・マニュアル

 TDzyme® C/T マニュアル


・アプリケーションノート(組織解離効率及び細胞生存率の比較分析)

 脂肪組織
 皮膚組織
 肝臓組織

お問い合わせ 試薬機器部: biosupport@filgen.jp P.052-624-4388 https://filgen.jp/
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